蕪湖市熱啟動Taq酶研發(fā)
發(fā)布時間:2023-06-04 01:28:27
蕪湖市熱啟動Taq酶研發(fā)
分子診斷是當代醫(yī)學發(fā)展的重要前沿領域之一,其核心技術是基因診斷,常規(guī)技術包括:(1)聚合酶鏈式反應(PCR);(2)DNA測序(DNA sequencing);(3)熒光原位雜交技術(FISH);(4)DNA印跡技術( DNA blotting );(5)單核苷酸多態(tài)性(SNP);(6)連接酶鏈反應(LCR);(7)基因芯片技術(gene chip)。

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全球,雖然只有少數的芯片可用于臨床診斷,但國內基因芯片技術已經處于世界領 跑的地位?;蛐酒夹g將是熒光定量PCR 檢測技術具挑戰(zhàn)的潛在對手,主要是:熒光定量PCR 技術一次只能檢測一個或幾個目標基因,而基因芯片技術可以實現(xiàn)對大量目標基因的同時檢測。隨著人類基因組計劃的進展,基因芯片在國內外已成為研發(fā)熱點。若基因芯片技術迅速成熟并大規(guī)模產業(yè)化,將對熒光定量PCR 檢測產生較大的沖擊。不過,基因芯片的大規(guī)模臨床應用還存在尚未克服的技術缺陷,主要是由于芯片診斷特異性和靈敏度低、芯片診斷成本高昂和芯片診斷配套儀器價格昂貴等原因,預計熒光定量PCR 檢測技術在今后5 到10 年內可保持前鋒。

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PCR產品占據分子診斷的主要市場,基因芯片是分子診斷市場發(fā)展的主要趨勢。PCR產品靈敏度高、特異性強、診斷窗口期短,可進行定性、定量檢測,可廣泛用于肝炎、性病、肺感染性疾病、優(yōu)生優(yōu)育、遺傳病基因、腫瘤等,填補了早期免疫檢測窗口期的檢測空白,為早期診斷、早期治療、安 全用血提供了有效的幫助。基因芯片是分子生物學、微電子、計算機等多學科結合的結晶,綜合了多種現(xiàn)代高精尖技術,被專家譽為診斷行業(yè)產品。但其成本高、開發(fā)難度大,產品種類很少,只用于科研和藥物篩選等用途。

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常規(guī)普通PCR常見問題:1. 優(yōu)化反應條件,梯度摸索退火溫度,延長退火延伸時間,增加反應循環(huán)數(30-45區(qū)間為宜)。2. 對核酸模板進行純化,或使用商業(yè)化核酸提取試劑盒進行提取,增加核酸模板的上樣量。3. 優(yōu)化反應體系(預混體系除外),改變檢測體系中的Mg2+濃度及dNTPs用量,更換體系中Buffer。4. 重新設計引物,避免引物二聚體和鏈內二級結構,在一次稀釋引物后可分裝成多支小管,減少反復凍融次數。

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動物疫病診斷的主要內容有:一是對血、 尿、糞等進行臨床常規(guī)化驗;二是從流行病學角度,調查研究動物疫病流行情況,主要調查動物發(fā)病時間及地點、疫病蔓延情況、疫情來源及傳播的途徑與方式等;三是從病理學方面,剖檢因忠傳染病而死亡的畜禽尸體,查看其病理變化,或者取病料進行送檢,再進一步做病理組織學方面的診斷;四是從微生物學角度,檢查、堅定從患病的畜禽病料當中分離并且培養(yǎng)出來的病原微生物,或者是進行動物接種試驗等,五是從免疫學角度,對組織或者細胞的變態(tài)反應、細胞的免疫功能及血清學反應等進行診斷。

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制定免疫計劃。各省份按照本意見要求,結合防控實際(含計劃單列市工作需求),制定本轄區(qū)的強制免疫計劃,報農業(yè)農村部畜牧獸醫(yī)局備案,抄送中國動物疫病預防控制心,并在省級農業(yè)農村部門門戶網站公開。對散養(yǎng)動物,采取春秋兩季集中免疫與定期補免相結合的方式進行,對規(guī)模養(yǎng)殖場(戶)及有條件的地方實施程序化免疫。實行“先打后補”。各省份可采用養(yǎng)殖場(戶)自行免疫、第三方服務主體免疫、政府購買服務等多種形式,推進“先打后補”工作,在2022年年底前實現(xiàn)規(guī)模養(yǎng)殖場(戶)全覆蓋,在2025年年底前逐步停止政府招標采購強制免疫疫苗。